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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC的使用注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-04-21  |  點(diǎn)擊率:1666
  血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)維持血管動(dòng)態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子。內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。這些過(guò)程都可以用培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行體外研究,人臍靜脈和動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是這類(lèi)研究中常用的細(xì)胞類(lèi)型。除了普通的內(nèi)皮細(xì)胞特征例如“鵝卵石狀”,VIII因子陽(yáng)性著色,能攝取乙?;兔芏戎鞍?,人臍血管內(nèi)皮細(xì)CD31染色陽(yáng)性。用IL-1或TNF-α預(yù)先處理過(guò)的細(xì)胞也能選擇性地表達(dá)E-selectin和VCAM。
  人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)提取于人臍帶靜脈組織,原代凍存。每管含有細(xì)胞數(shù)>5×105cells/ml,此細(xì)胞通過(guò)vWF/FactorVIII和CD31(P-CAM)免疫熒光染色驗(yàn)證,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。細(xì)胞可以達(dá)到15倍增。
  人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系HUVEC的注意事項(xiàng):
  1.該細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基要求較高,請(qǐng)使用推薦培養(yǎng)基。
  2.培養(yǎng)基分為4度保存的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和—20度保存的添加物。推薦對(duì)添加物溶解后進(jìn)行分裝,使用前按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行配置*培養(yǎng)基,每次配置的*培養(yǎng)基應(yīng)盡量在2周以?xún)?nèi)用完,并盡量避光且在室溫下放置太長(zhǎng)時(shí)間。
  3.該細(xì)胞對(duì)消化較為敏感,消化時(shí)應(yīng)避免消化過(guò)度,注意觀察細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞剛剛消化完畢就輕輕吹打下來(lái)。
  4.該細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)嘗試一些細(xì)胞碎片。