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骨髓間充質干細胞常用的分離方法有哪些

更新時間:2022-04-25  |  點擊率:1797
  骨髓間充質干細胞是骨髓基質干細胞,是人們在哺乳動物的骨髓基質中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細胞的多種分化潛能的細胞亞群。它們對骨髓中的造血干細胞(HSC)不僅有機械支持作用,還能分泌多種生長因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。
  目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據(jù)干細胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢特性,定期換液除去不貼壁細胞,從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細胞成分比重的不同,分離單核細胞進行貼壁培養(yǎng)。二者本質上無多大區(qū)別。隨著對MSC表面抗原認識的深入,又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經(jīng)過流式或磁珠分選后的細胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問題,加之成本較高和技術的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。
  動物實驗已經(jīng)證實,骨髓間充質干細胞單獨應用可以較好地促進骨折愈合和軟骨損傷的修復,通過體外培養(yǎng)使其覆蓋于陶瓷支架或碳纖維網(wǎng)絡等再植入患處效果更明顯。骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng),因具有黏附于塑料培養(yǎng)皿壁的能力而易于分享,體外經(jīng)過長期連續(xù)培養(yǎng)和冷凍保存后不會改變其分化潛能,植入以后可以分化成造血以外的組織,如肺、軟骨、骨、神經(jīng)等,并表現(xiàn)出相應組織細胞的表型。